紫外分光光度計基本工作原理和紅外光譜儀相似，利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機物質，引起分子中價電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜，反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內，對于一個特定的波長，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測量光譜可以進行定性分析，而且根據吸收與已知濃度的標樣的比較，還能進行定量分析。

紫外分光光度計 主要用途：
紫外可見光譜儀涉及的波長范圍是0.2--0.8微米（對應波數50000-12500厘米-1），它在有機化學研究中得到廣泛的應用。通常用作物質鑒定、純度檢查，有機分子結構的研究。在定量方面，可測定結構比較復雜的化合物和混合物中各組分的含量，也可以測定物質的離解常數，絡合物的穩定常數，物質分子量鑒別和微量滴定中指示終點以及在高效液相色譜中作檢測器等。                            

紫外分光光度計選擇：

在選擇各種儀器時，都有一定的標準，如測量精度、或者測量范圍。而在選擇紫外分光光度計時，我們考慮的是光學構造、光譜范圍、樣品類型和分析工具。

光學構造主要是指紫外分光光度計給出的光是單光束還是雙光束。單光束是通過單束光進行測量，在測量過程中給定波長，然后通過被測物和對照物得到吸光結果。而雙光束是通過一個斬光輪將光束一分為二。

光源包括紅外線、紫外線和可見光。鎢燈和鹵素燈一般只覆蓋可見光部分（大約380 nm 到800 nm）。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區域。

分光光度計通常使用光電倍增管和光敏二極管來測量吸光值。

大部分的樣品類型中，分光光度計可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。
大部分單機型的分光光度計包含了驅動儀器運行和管理數據的軟件。高性能的儀器，通常與PC機一起聯用，需要從制造商提供額外的軟件。同時用戶也可以選擇升級軟件以滿足他們的需要。